在密閉的滅菌器內(nei)，蒸(zheng)汽不(bu)(bu)能外溢，壓力(li)不(bu)(bu)斷上(shang)升，使(shi)水(shui)的(de)沸(fei)點不(bu)(bu)斷提高，從而鍋內(nei)溫(wen)度(du)也隨之增加。在0.1MPa的(de)壓力(li)下，鍋內(nei)溫(wen)度(du)達121℃。在此蒸(zheng)汽溫(wen)度(du)下，可以很快(kuai)殺死各(ge)種細菌及其高度(du)耐熱的(de)芽孢。

當完(wan)全排除滅(mie)(mie)菌器內(nei)空氣(qi)，使鍋內(nei)全部是水蒸(zheng)氣(qi)，滅(mie)(mie)菌才能(neng)徹底(di)。滅(mie)(mie)菌放(fang)(fang)氣(qi)有幾種(zhong)不同的做(zuo)法(fa)，但目的都是要(yao)排凈空氣(qi)，使鍋內(nei)均(jun)勻升(sheng)溫，保證滅(mie)(mie)菌徹底(di)。常用(yong)方法(fa)是關(guan)閉(bi)放(fang)(fang)氣(qi)閥(fa)(fa)，通電后，待(dai)壓力(li)(li)(li)上(shang)升(sheng)到(dao)0.05MPa時(shi)，打(da)開放(fang)(fang)氣(qi)閥(fa)(fa)，放(fang)(fang)出(chu)空氣(qi)，待(dai)壓力(li)(li)(li)表指針歸零后，再關(guan)閉(bi)放(fang)(fang)氣(qi)閥(fa)(fa)。關(guan)閥(fa)(fa)再通電后，壓力(li)(li)(li)表上(shang)升(sheng)達(da)到(dao)0.1MPa時(shi)，開始(shi)計時(shi)，維(wei)持壓力(li)(li)(li)0.1-0.15MPa20分鐘。

到達保(bao)壓(ya)時間后，即可切斷電源(yuan)，在(zai)壓(ya)力(li)(li)(li)降到0.5MPa，可緩慢放(fang)出蒸氣(qi)，應(ying)注意(yi)不(bu)要使(shi)(shi)壓(ya)力(li)(li)(li)降低太快，以(yi)致引起激烈的減壓(ya)沸騰，使(shi)(shi)蒸汽滅菌器(qi)中的液體四溢。當壓(ya)力(li)(li)(li)降到零后，才能(neng)開(kai)蓋，取出培養(yang)基，擺(bai)(bai)在(zai)平臺上，以(yi)待冷凝。不(bu)可久(jiu)不(bu)放(fang)氣(qi)，引起培養(yang)基成分變化，以(yi)至培養(yang)基無(wu)法擺(bai)(bai)斜面。一(yi)旦放(fang)置過久(jiu)，由于鍋(guo)爐(lu)內有(you)負壓(ya)，蓋子打(da)不(bu)開(kai)，只要將放(fang)氣(qi)閥(fa)打(da)開(kai)，大(da)氣(qi)壓(ya)入，內外壓(ya)力(li)(li)(li)平衡，蓋子便易(yi)打(da)開(kai)了(le)。

滅菌器氣壓(ya)針所指的壓(ya)強不是飽(bao)和蒸(zheng)汽(qi)產生的壓(ya)強。相(xiang)同的壓(ya)強，混有空氣的蒸(zheng)汽(qi)其溫(wen)度(du)低于(yu)飽(bao)和蒸(zheng)汽(qi)所產生的溫(wen)度(du)。因此完全(quan)排除鍋(guo)內空氣使鍋(guo)內全(quan)部(bu)是水蒸(zheng)氣，滅菌才能徹底。